如何正确选择激发滤光片和荧光滤光片
2024-06-14
林树鑫
激发滤光片与荧光滤光片的要点是确保它们都能有效分离和选择物质的激发光与发射荧光的特征波段光谱，同时最大限度地减少背景光源的干扰。
激发滤光片的选择
激发滤光片主要用于选择透过某个波段的光，以激发荧光染料。在荧光显微镜中，激发滤光片的作用是仅允许激发荧光的波长通过。其选择主要基于待测物质的激发光谱特性，即需要选择与待测物质激发光谱的最大峰值波长相近的最大透射比的滤光片。
激发滤光片的类型有多种，如干涉滤光片、胶膜滤光片和玻璃滤光片，选择合适的类型也是根据具体的实验需求和应用场景。激发光源的强度对滤光片的寿命也有影响，因此选择时也需要考虑光源的强度。
荧光滤光片的选择
荧光滤光片主要用于观察和分离荧光材料发射的特定波长光，荧光滤光片的选择原则是尽可能让荧光即发射光通过，同时最大程度阻挡激发光，从而获得最佳的信噪比，其选择主要是基于待测物质的荧光光谱特性，即需要能够滤去杂散光、瑞利散射光以及部分杂质的荧光。在荧光测量中，荧光滤光片的设计目的是消除溶剂的拉曼散射光、瑞利散射光以及部分杂质的荧光。
在测试样品发射光谱时，选择比激发波长大20nm左右的滤光片，以使样品发射的荧光透过但不会使激发光杂散光透过，减少背景光源的干扰。测试样品激发光谱时，选择比发射波长小20nm左右的滤光片，以确保发射波长阻隔，确保发射波长之前的光谱能有较好的信号。
优秀的荧光滤光片应该要满足与燃料的激发峰、发射峰匹配且交叠�。刂股疃壬睿苑⒂庑。约巴妇得嫘魏茫谟獬上竦奶崛�。透镜表面的平整度对成像质量有重要影响，波前扭矩或楔角的不利影响应尽可能减少。